Les souris diabétiques ont été vieillies pendant au moins 16 semaines avant que des échantillons de sang aient été prélevés avec des tubes d`EDTA-Vaccu. Les tubes ont été immédiatement mis sur la glace et le dosage HgbA1C effectué avec le système DCA de Siemens et lus par Bayer DCA 2000-1 (modèle 5031C). En collaboration avec le centre de modélisation des maladies humaines (CMHD), nous avons réalisé un écran autosomique dominant N-ethyl-N-nitrosourea (ENU) pour identifier les mutations dans les gènes responsables des phénotypes rénaux. L`ENU induit des mutations ponctuelles dans l`ADN génomique à une fréquence de 1 × 10 − 3 par locus, ce qui représente plus de 100 fois plus que le taux de mutation spontanée estimé. 10 de nombreux consortiums ENU ont été créés à l`échelle internationale pour générer de nouvelles modèles pour une variété de maladies humaines (Voir l`examen récent par Soewarto et al. 11). Dans cette étude, l`écran rénal à haut débit consistait en une analyse d`urine de la progéniture G1. La mutagenèse ENU a été exécutée sur l`arrière-plan C57BL6. 150 les souris G1 ont été criblées et nous avons identifié une variante phénotypique unique, Pee sucrée, qui présentait une Glucosurie rénale isolée avec de la normoglycemie. Backcrossing ce mutant fondateur avec la souche C3H de type sauvage a généré des portées pour confirmer l`héritabilité du phénotype. La glucosurie intermittente était robuste et héréditaire en tant que trait dominant, car elle représentait près de 100% de pénétrance dans 50% du G2.

Bienvenue à la communauté de commentaires de The Globe and Mail. Il s`agit d`un espace où les abonnés peuvent interagir entre eux et le personnel de globe. Les non-abonnés peuvent lire et trier les commentaires, mais ils ne seront pas en mesure de s`engager avec eux de quelque manière que ce soit. Cliquez ici pour vous abonner. § Centre de modélisation des maladies humaines, Toronto Centre for phénogénomique, Toronto, Ontario, Canada; Bienvenue à la communauté de commentaires de The Globe and Mail. Il s`agit d`un espace où les abonnés peuvent interagir entre eux et le personnel de globe. Les souches de souris inbred C57BL/6J (B6) et C3H/HeJ (C3H) ont été obtenues du laboratoire Jackson (Bar Harbor, ME). Mutant Sweet Pee a été généré sur un fond génétique de la mutagénisation B6 et WT C3H, dans le cadre d`un projet ENU dans le centre de modélisation des maladies humaines (CMHD) pour la mutagenèse à l`échelle du génome, Toronto, Canada. La mutagenèse ENU a été effectuée comme décrit précédemment. 29 le SP mutant a été identifié sur un écran dominant à la semaine 6.

Une lignée d`élevage mutant a été établie en rétrocroisant ce fondateur au WT C3H. L`héritabilité de la glucosurie a été confirmée. Un rétrocroisement ultérieur qui impliquait la reproduction entre le mutant sp nouvellement identifié et les souris WT C3H/Hej, ainsi que l`intercroisement entre des mutants SP ont été mis en place pour la cartographie et une caractérisation phénotypique. L`utilisation des souris dans cette étude a été approuvée par le Comité de soins aux animaux de l`hôpital Mount Sinai, conformément à la Loi sur les animaux pour la recherche de l`Ontario et au Conseil fédéral canadien sur les soins aux animaux. Toutes les souris utilisées dans cette étude étaient masculines et maintenues sur le Chow-rongeur standard. Amazon est censé faire pipi employés d`entrepôt dans des bouteilles, et malheureusement, ce n`est pas surprenant. La nouvelle accusation vient de l`auteur James Bloodworth, qui est allé sous couverture dans un entrepôt Amazon au Royaume-Uni. Bloodworth dit au soleil que certains ouvriers ont été forcés de marcher tout l`entrepôt de 700 000 pieds carrés (un quart de Mile, 10 minutes à pied) pour se rendre à deux salles de bains qui ont servi l`ensemble de quatre étages, 1 200-employé de travail. L`expression de SGLT2 est altérée dans les mutants Sweet Pee.

(A) les mutants homozygotes n`ont démontré aucune expression protéique SGLT2 dans le rein: immunofluorescence avec anticorps IgG polyclonaux de chèvre contre le N-terminus (K17) de la souris SGLT2 à grossissement × 20. (B) le séquençage a révélé l`insertion d`une seule thymine dans l`exon 4 à la position 433.